El estudio del daño en el ADN y de la respuesta celular para repararlo es clave en biología molecular, investigación sobre cáncer y desarrollo de nuevos fármacos. Las roturas de cadena sencilla (SSB) y doble (DSB), así como otras modificaciones químicas, pueden comprometer la estabilidad genómica de las células y conducirlas a la muerte si no se reparan adecuadamente. Para entender estos procesos, Revvity ha desarrollado el PhenoVue™ DNA Damage Response Staining Kit.
¿Estudias cómo las células detectan y reparan el daño en el ADN a través de las vías de respuesta? ¿Quieres monitorizar la activación de las vías DDR o cribar fármacos genotóxicos? Si es así, sigue leyendo.
¿Por qué es importante analizar el daño en el ADN?
Las células cuentan con un sofisticado mecanismo conocido como respuesta al daño en el ADN (DDR) para detectar y reparar las lesiones en su material genético. Uno de los primeros eventos tras una rotura de doble cadena es la fosforilación de H2AX, que da lugar a γ-H2AX, un marcador ampliamente utilizado para identificar estos puntos de rotura. Este proceso también recluta proteínas clave, como 53BP1, que ayudan a coordinar la reparación del ADN. Estudiar estos marcadores es esencial para avanzar en el conocimiento de la biología del cáncer, la estabilidad genómica y la acción de nuevos tratamientos.
¿Qué ofrece el PhenoVue™ DNA Damage Response Staining Kit?
El PhenoVue™ DNA Damage Response Staining Kit ha sido diseñado para facilitar el análisis de la DDR mediante técnicas de imagen de alto contenido.
El kit incluye:
🔹 Anticuerpos específicos frente a γ-H2AX y 53BP1, validados para su uso en ensayos celulares.
🔹 PhenoVue Hoechst 33342 para una tinción nuclear precisa.
🔹 Fluoróforos optimizados (PhenoVue Fluor 488 y Fluor 647) que aseguran una señal clara y sin solapamiento espectral.
Gracias a esta combinación, el kit permite obtener imágenes de alta calidad que muestran de forma nítida los focos nucleares donde se concentra la actividad reparadora del ADN. Es compatible con otros colorantes fluorescentes, lo que amplía las posibilidades en ensayos multiparamétricos.
¿Cómo se aplica en el laboratorio?
El flujo de trabajo es sencillo y está optimizado para laboratorios que usan sistemas de análisis de alta resolución y alto contenido como Opera Phenix™ Plus u Operetta CLS™:
1. Fijación y permeabilización celular.
2. Incubación con los anticuerpos primarios frente a γ-H2AX y 53BP1.
3. Tinción con Hoechst y anticuerpos secundarios fluorescentes.
4. Captura de imágenes y análisis.
Este kit es ideal para estudios de estabilidad genómica, cribado de fármacos antitumorales o ensayos de toxicidad genotóxica.
¿Dónde puede ayudarte nuestro equipo?
Si deseas más información sobre el PhenoVue™ DNA Damage Response Staining Kit, su uso en distintos protocolos o su compatibilidad con los sistemas de imagen de tu laboratorio, nuestro equipo de especialistas estará encantado de asesorarte. Si estás interesado en conocer otros kits de tinción celular, contáctanos y te ayudaremos a encontrar el que mejor se adapta a tus necesidades.
